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養(yǎng)殖場消毒池常用消毒劑殺菌效能對比

  來源:dy-100.com
  眾所周知,養(yǎng)殖場的消毒池是門衛(wèi)消毒系統(tǒng)一個(gè)關(guān)鍵組成部分,是隔絕外界病原微生物進(jìn)入養(yǎng)殖場內(nèi)環(huán)境的重要門戶。筆者通過調(diào)查走訪多家規(guī)模養(yǎng)豬場和養(yǎng)雞場,了解到目前規(guī)模場技術(shù)人員對消毒池的消毒劑選擇、更換頻率、消毒效果的認(rèn)知存在許多誤區(qū)。因此筆者模擬消毒池狀況對當(dāng)前消毒池多種常用消毒劑進(jìn)行殺菌對比試驗(yàn),希望試驗(yàn)結(jié)果能對規(guī)模養(yǎng)殖場的相關(guān)技術(shù)人員起到參考借鑒作用。
  一、材料

  1、消毒劑:NaOH水溶液(2%水溶液,燒堿為市場采購工業(yè)級(jí),25KG裝,含量98%,批號(hào):20150304);消毒威水溶液(含二氯異氰脲酸鈉30%,由湖南五指峰有限公司提供,批號(hào):20150501,按1:1200倍稀釋);五指峰新菌敵水溶液(含量:戊二醛5%+癸甲溴銨5%,批號(hào):20150517,由湖南五指峰生化有限公司提供,按1:500倍稀釋);好典水溶液(含聚維酮碘5%,批號(hào):20150602,由湖南五指峰生化有限公司提供,按1:300倍稀釋)。

  2、消毒劑指標(biāo)菌:大腸埃希氏菌(8099)、多殺性巴氏桿菌(禽株)、金黃色葡萄球菌(ATCC6538)、蠟狀桿菌芽孢(SSICl/1)。(均購自中國獸藥監(jiān)察所)
  3、中和劑的配制
 ?。?)中和劑(1):自制復(fù)合中和劑,用于中和消毒威水溶液、新菌敵水溶液、好典水溶液。精密稱取無水磷酸氫二鈉2.83g、磷酸二氫鉀1.36g、胰蛋白胨10g、牛肉粉3g、葡萄糖2g、硫代硫酸鈉5g、卵磷脂3g、甘氨酸3g、吐溫-80各30mL。將各成分加入到1L蒸餾水中,待完全溶解后,調(diào)pH至7.2~7.4,于121℃壓力蒸氣滅菌20min,冰箱保存?zhèn)溆谩#ㄒ陨显噭┖驮囁幘徸試幖瘓F(tuán)化學(xué)試劑有限公司)
 ?。?)中和劑(2):2%NaOH水溶液,需要等當(dāng)量的酸來中和。因此,通過計(jì)算摩爾含量,將5.56g含量為36%的濃HCl溶液加入1000g純化水中配制成NaOH水溶液中和劑,于121℃壓力蒸氣滅菌20min,冰箱保存?zhèn)溆谩?br />   4、稀釋液:氯化鈉注射液(0.9%)。(購自四川科倫藥業(yè)公司)
  二、方法{參照《獸用消毒劑鑒定技術(shù)規(guī)范》(1992)農(nóng)(牧藥)字第101號(hào)}
  1、中和劑選擇試驗(yàn):選擇指定濃度的消毒劑,以蠟樣桿菌芽孢和大腸桿菌為受試菌,分別進(jìn)行中和劑鑒定試驗(yàn)。試驗(yàn)可分為6組:第1組:消毒劑+菌懸液;第2組:(消毒劑+菌懸液)+中和劑;第3組:中和劑+菌懸液;第4組:(消毒劑+中和劑)+菌懸液;第5組:稀釋液+菌懸液;第6組:中和劑+稀釋液。
  2、細(xì)菌、芽孢懸液定量殺菌試驗(yàn)
 ?。?)將制備的菌液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),然后用氯化鈉注射液稀釋成含菌106~107CFU/mL的試驗(yàn)菌液;
 ?。?)將消毒劑樣品用純化水按指定稀釋比例稀釋至測試濃度;
 ?。?)吸取0.5mL試驗(yàn)菌液于4.5mL測試濃度的消毒劑溶液內(nèi);
  (4)置20℃水浴中作用5分鐘;
  (5)立即吸取上述菌藥混合液1.0mL,加入9.0mL中和液中混勻;
  (6)以氯化鈉注射液(0.9%)代替消毒液,同時(shí)進(jìn)行上述各步驟,作為對照組;
 ?。?)以上各步驟均設(shè)置一個(gè)平行對照;
 ?。?)中和10分鐘后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),37℃培養(yǎng)24h,計(jì)算殺菌率;
  (9)模擬消毒池實(shí)際狀況,將各試驗(yàn)消毒劑敞開暴露在室外,每天重復(fù)進(jìn)行上述試驗(yàn),共7天,記錄試驗(yàn)數(shù)據(jù),分析試驗(yàn)結(jié)果。
  三、結(jié)果
  1、中和劑選擇試驗(yàn)的試驗(yàn)結(jié)果為第1組不長菌或有極少數(shù)菌生長;第2組長少量菌且比第1組多,比第3、4、5組的菌數(shù)少;第3、4、5組的菌數(shù)相當(dāng)且誤差率小于15%;第6組無污染。說明所配制中和劑在細(xì)菌和芽孢的殺菌試驗(yàn)中可有效中和本消毒劑,并對細(xì)菌、芽孢及培養(yǎng)基無不良影響。
  

  2、消毒劑(第一天)對細(xì)菌、芽孢懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果見表一。

  3、試驗(yàn)持續(xù)7天,每天重復(fù)殺菌試驗(yàn)效果見表二。


  四、結(jié)論
  2%NaOH水溶液、湖南五指峰生化有限公司生產(chǎn)的消毒威1:1200倍稀釋、新菌敵1:500倍稀釋、好典1:300倍稀釋的水溶液(現(xiàn)配現(xiàn)用),作用5分鐘對大腸埃希氏菌、多殺性巴氏桿菌、金黃色葡萄球菌、蠟狀桿菌芽孢的殺滅率99.9%以上,其消毒效能符合規(guī)定。
  四種試驗(yàn)消毒劑對大腸埃希氏菌、多殺性巴氏桿菌、金黃色葡萄球菌、蠟狀桿菌芽孢四種消毒劑指標(biāo)菌的殺滅率在第一天都能達(dá)到99.9%以上,其消毒效能符合要求。2%NaOH水溶液在第二天殺菌率未達(dá)到99.9%以上;30%消毒威1:1200倍稀釋的水溶液在第四天殺菌率未達(dá)到99.9%以上;新菌敵1:500倍稀釋的水溶液在第三天殺菌率未達(dá)到99.9%以上;好典1:300倍稀釋的水溶液在第二天殺菌率未達(dá)到99.9%以上,其消毒效能不符合規(guī)定。
  五、說明
  1、依據(jù)《現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法》的體外殺菌實(shí)驗(yàn)的菌落計(jì)數(shù)方法,低于5個(gè)菌落的視同為殺菌完全,故試驗(yàn)消毒劑大腸埃希氏菌、多殺性巴氏桿菌、金黃色葡萄球菌、蠟狀桿菌芽孢的殺菌率計(jì)為100%;
  2、氯化鈉注射液對照組的平板均有大量細(xì)菌生長,其菌落數(shù)按試驗(yàn)菌液100倍稀釋后的菌落數(shù)計(jì)算。
  3、依據(jù)《獸用消毒劑鑒定技術(shù)規(guī)范》(1992)農(nóng)(牧藥)字第101號(hào)的試驗(yàn)消毒效能判斷標(biāo)準(zhǔn),殺滅指數(shù)須達(dá)103或殺菌率達(dá)99.9%以上,故試驗(yàn)消毒劑消毒效能符合規(guī)定。
  六、分析
  通過試驗(yàn)結(jié)果可知,四種消毒池常用消毒劑在現(xiàn)配現(xiàn)用的情況下都具有良好的消毒效果,具有速效、強(qiáng)效的殺滅效力,在5分鐘內(nèi)即車輪緩慢經(jīng)過消毒池時(shí)能有效消毒。在持續(xù)7天的試驗(yàn)中可見,NaOH水溶液和好典稀釋液在暴露室外的第二天還能維持90%以上對四種消毒劑指標(biāo)菌的殺滅率,在第四天殺菌率下降一半,在第六天基本不具備殺菌能力。分析其原因,NaOH水溶液能與空氣中的二氧化碳反應(yīng)生成NaCO3,使溶液中NaOH含量迅速下降,導(dǎo)致殺菌效力急速遞減;好典中的聚維酮碘在高溫和陽光曝曬下急速分解,含量急速下降,使殺菌效力快速降低。這兩種消毒劑不適合長期使用,因此建議養(yǎng)殖場用戶不要在消毒池使用NaOH和聚維酮碘溶液。消毒威和新菌敵稀釋液在1-2天內(nèi)能維持99.9%以上的殺菌率,在第四天還能維持90%左右的殺菌率,在第七天還具有60%~80%的殺菌率,具有高效、速效、長效作用,能做為消毒池專用消毒劑使用。消毒威主要成分為二氯異氰脲酸鈉,是一種高效、廣譜、新型內(nèi)吸性殺菌劑,可殺滅各種細(xì)菌、藻類、真菌和病毒;化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,便于貯存運(yùn)輸;使用安全、簡便、用量少、藥效持續(xù)時(shí)間長;作用在物體表面能慢慢地釋放次氯酸(HClO),通過使菌體蛋白質(zhì)變性,改變膜通透性,干擾酶系統(tǒng)生理生化及影響DNA合成等過程,使病原體迅速死亡。新菌敵主要含有戊二醛和癸甲溴銨。戊二醛屬高效消毒劑,具有廣譜、高效、低毒、對金屬腐蝕性小、受有機(jī)物影響小、穩(wěn)定性好等特點(diǎn),主要作用于菌體蛋白的巰基、羥基、羧基和氨基,可使之烷基化,引起蛋白質(zhì)凝固造成細(xì)菌死亡。癸甲溴銨為雙鏈季銨鹽類陽離子表面活性劑,其季銨陽離子能主動(dòng)吸引并富集于帶負(fù)電荷的細(xì)菌和病毒表面,阻礙細(xì)菌代謝,導(dǎo)致其膜的通透性發(fā)生改變。二者復(fù)配而成的新菌敵消毒劑,對各類病原微生物具有高效、速效、長效的殺滅作用,使用后殘留少、安全、環(huán)保,是理想的新型復(fù)配消毒劑。
  通過結(jié)論分析,我們推薦在養(yǎng)殖場消毒池使用30%消毒威(通用名:二氯異氰脲酸鈉粉)按1:1200倍稀釋、新菌敵(通用名:戊二醛癸甲溴銨溶液)按1:500倍稀釋進(jìn)行車輪和鞋底消毒,每5-6天更換1次;不建議使用燒堿(NaOH)和聚維酮碘溶液消毒。



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